Arbeitsblatt: DNA extrahieren Versuch

DNA extrahieren 1. Du gibts am Ende des Versuchs ein sauberes Versuchsprotokoll ab. Unter dem Punkt «Vermutung» schreibst du zusätzlich auf, welche Schwierigkeiten möglicherweise auftreten könnten. (Greife diesen Punkt in der Auswertung wieder auf). 2. Suche alle Materialien zusammen und baue den Versuch wie auf dem Bild auf. 3. Arbeite sorgfältig, mache dir Notizen und räume die Materialein am Schluss sauber weg und vor allem dorthin, wo sie hingehören. Materialliste Tomaten Kaffeefilter und Trichter Kochsalz 2g Küchenmesser Wasser (20ml) Mörser Pistill Spülmittel (3ml) Brennsprit Reagenzglas Zahnstocher Holzstab Becherglas (klein) Schneidbrett Schutzbrille Versuchsanleitung 1. Schneide eine halbe Tomate mit einem Küchenmesser in kleine Stücke und gib sie in die Mörserschale. 2. Gib das Spülmittel und das Salz dazu. 3. Zerstampfe die Tomatenstückchen während einer Minute gründlich. Es soll ein Brei entstehen. 4. Gib das Wasser hinzu und mörsere das Gemisch nochmals für 1-2 Minuten. Lass es für 10 Minuten stehen. 5. Lass den Inhalt des Mörsers durch einen Kaffeefilter in ein frisches Glas tröpfeln. 6. Fülle ca. zwei Fingerbreit des filtrierten Gemischs in das Reagenzglas. 7. Gib langsam den Brennsprit dazu (am Rand des RG herunterlaufen lassen). 8. Schüttle das Reagenzglas ganz leicht, damit sich die verschiedenen Stoffe darin vermischen. 9. Nun lassen wir das Gemisch eine gewisse Zeit stehen. 10. Alle anderen Materialien werden entsorgt (normaler Abfall). Die DNA ist nun als weisser Knäuel zu sehen, den du mit einem Zahnstocher aus dem Reagenzglas fischen kannst. Versuchsprotokoll Name Titel Versuchsbeschrieb eigene Bilder Beobachtung Auswertung (Schwierigkeiten, Resultate etc.) Merksatz Was steckt dahinter? Spülmittel bricht die Zellhülle auf In einem ersten Schritt muss die DNA aus dem Zellkern befreit werden. Der Mörser reisst die Zellen auseinander und bricht sie teilweise auf. Mit dem Spülmittel und der Säure der Zitrone wird nun die Zell- und die Kernhülle aufgelöst. Das geschieht folgendermassen: Das Spülmittel ist ein sogenanntes Detergenz, das heisst ein Stoff, der Fette in Lösung bringt. Da die Hülle der Zelle und des Kerns aus Fetten besteht, löst sie sich im Spülmittel auf. Die Säure der Zitrone erhöht die Löslichkeit der Fette. DNA ist wasserlöslich Wasserteilchen sind zwar nicht geladen, sie haben aber eine Polarität. Das heisst, innerhalb des Wasserteilchens gibt es eine Seite, die mehr positiv und eine andere Seite, die mehr negativ geladen ist. Durch diese Polarität kann sich die mehr positive Seite des Wassers an die negativ geladene DNA lagern und macht sie somit löslich. Sie kann problemlos durch den Kaffeefilter fliessen. Die Salzkonzentration im Extraktionspuffer entspricht ungefähr den Verhältnissen im lebenden Organismus, also einer physiologischen Kochsalzlösung. Durch Brennsprit bilden sich DNA-Knäuel Brennsprit hat keine solche Polarität wie das Wasser. Gibt man nun Brennsprit zu dem Gemisch aus Wasser und Zellbestandteilen, wird die DNA unlöslich, beginnt zu verklumpen und wird als weisser Knäuel sichtbar.